BUOD AT PALIWANAG ANG PAGSUSULIT
Ang malaria ay isang sakit na dala ng lamok, hemolytic, febrile na nakakahawa sa mahigit 200 milyong tao at pumapatay ng higit sa 1 milyong tao bawat taon.Ito ay sanhi ng apat na species ng Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, at P. malariae.Ang mga plasmodia na ito ay nakakahawa at sumisira sa mga erythrocyte ng tao, na nagbubunga ng panginginig, lagnat, anemia, at splenomegaly.Ang P. falciparum ay nagdudulot ng mas matinding sakit kaysa sa iba pang plasmodial species at dahilan ng karamihan sa pagkamatay ng malaria.Ang P. falciparum at P. vivax ay ang pinakakaraniwang mga pathogen, gayunpaman, mayroong malaking heograpikong pagkakaiba-iba sa pamamahagi ng mga species.
Ayon sa kaugalian, ang malaria ay nasuri sa pamamagitan ng pagpapakita ng mga organismo sa Giemsa na may bahid ng makapal na pahid ng peripheral blood, at ang iba't ibang uri ng plasmodium ay nakikilala sa pamamagitan ng kanilang hitsura sa mga nahawaang erythrocytes1.Ang pamamaraan ay may kakayahang tumpak at maaasahang pagsusuri, ngunit kapag ginawa lamang ng mga bihasang microscopist gamit ang mga tinukoy na protocol2, na nagpapakita ng mga pangunahing hadlang para sa malalayo at mahihirap na lugar sa mundo.
Ang Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit ay binuo para sa paglutas ng mga hadlang na ito.Ang pagsubok ay gumagamit ng isang pares ng mga monoclonal at polyclonal antibodies sa P. falciparum na tiyak na protina, histidine ulitin ang protina II (PhRP-II), at isang pares ng monoclonal antibodies sa plasmodium lactate dehydrogenase (PLDH), isang protina na ginawa ng apat na species ng plasmodium, sa gayon ay nagbibigay ng sabay na pagtanggal at pagkakaiba-iba ng impeksyon sa P. Iba pang tatlong Plasmodia.Maaari itong isagawa ng hindi sanay o minimally skilled personnel, nang walang kagamitan sa laboratoryo.
PRINSIPYO
Ang Pf/ Pan Malaria Rapid Test kit ay isang lateral flow chromatographic immunoassay.Ang mga bahagi ng test strip ay binubuo ng: 1) isang burgundy colored conjugate pad na naglalaman ng mouse anti- pHRP-II antibody conjugated na may colloid gold (pHRP II-gold conjugates) at mouse anti-pLDH antibody conjugated na may colloid gold (pLDH-gold conjugates),
2) isang nitrocellulose membrane strip na naglalaman ng dalawang test bands (Pan at Pv bands) at isang control band (C band).Ang pan band ay pre-coated na may monoclonal anti-pLDH antibody kung saan ang impeksyon sa alinman sa apat na species ng plasmodia ay maaaring matukoy, ang Pf band ay pre-coated ng polyclonal anti-pHRP-II antibodies para sa pagtuklas ng Pf infection, at ang C band ay pinahiran ng goat anti-mouse IgG.
Sa panahon ng assay, ang isang sapat na dami ng ispesimen ng dugo ay ibinibigay sa sample well (S) ng test cassette, isang lysis buffer ay idinagdag sa buffer well (B).Naglalaman ang buffer ng detergent na nagli-lyses ng mga pulang selula ng dugo at naglalabas ng iba't ibang plasmodium antigens, na lumilipat sa pamamagitan ng pagkilos ng capillary sa buong strip na hawak sa cassette.Ang pHRP-II kung mayroon sa specimen ay magbubuklod sa pHRP II-gold conjugates.Ang immunocomplex ay kinukuha sa lamad ng mga pre-coated na anti-pHRPII antibodies, na bumubuo ng isang Pf band na may kulay burgundy, na nagpapahiwatig ng isang positibong resulta ng pagsubok sa Pf.Ang pLDH kung naroroon sa ispesimen ay magbubuklod sa mga pLDH na gintong conjugates.Ang immunocomplex pagkatapos ay kinukuha sa lamad ng pre-coated na anti pLDH antibody, na bumubuo ng isang kulay burgundy na Pan band, na nagpapahiwatig ng isang positibong resulta ng pagsubok sa plasmodium.Kung walang Pan band, maaaring magrekomenda ng positibong resulta ng pagsubok para sa alinman sa tatlo pang plasmodia.
Ang kawalan ng anumang test band (Pan at Pf) ay nagmumungkahi ng negatibong resulta.Naglalaman ang pagsubok ng internal control (C band) na dapat magpakita ng burgundy colored band ng immunocomplex ng goat anti-mouse IgG / mouse IgG (pHRP-II at pLDH-gold conjugates) anuman ang pagbuo ng kulay sa alinman sa mga test band.Kung hindi, ang resulta ng pagsubok ay hindi wasto at ang ispesimen ay dapat muling suriin gamit ang isa pang device.
